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阴离子交换柱使用特性及维护

更新时间:2017-01-16 点击次数:3338
阴离子交换柱是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。阴离子交换柱中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。
 
阴离子交换柱的使用特性
1. 常用于分离在水溶液中呈阴离子态的化合物;
2. 阴离子交换柱能与水和有机溶剂兼容,可用甲醇、乙腈和水(包括缓冲盐溶液)作流动相进行分析;
3. 阴离子化合物的保留能力与流动相的pH、离子强度、流动相中有机相的比例以及温度有关。通常离子强度越大保留时间越短,流动相中有机相的比例越大保留时间越长;
4. 柠檬酸盐和磷酸盐等缓冲盐通常用于调整流动相的pH和离子强度以改善分离度,但不应超过其pH范围;
5. 阴离子交换柱的平衡时间相对C18而言较长。
 
阴离子交换柱的维护
1. 流动相抽滤过0.45um滤膜,样品针筒过滤;
2. 使用前,先用过渡流动相以1.0ml/min过渡30min,然后用流动相走基线,基线平稳后进样;使用后,先用纯水以1.0ml/min反向冲洗色谱柱40min;然后用40%甲醇反向冲洗40min,保存;过渡流动相,是指有机相和水相比例与流动相相同,只是过渡流动相不含缓冲盐;
3. 使用保护柱和预柱以延长色谱柱的使用寿命;
4. 再生:反方向接柱,流速0.4ml/min,分别洗脱30ml,依次为1M硝酸铵—40%甲醇溶液—异丙醇—水—洗脱液,然后按规定方向装柱,用洗脱液洗脱至平衡。

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