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如何更好的使用快速液相色谱柱

更新时间:2019-11-12 点击次数:1328
快速液相色谱柱的工作原理
当流动相中携带的混合物流经固定相时,其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随着流动相的移动,混合物在两相间经过反复多次的分配平衡,使得各组分被固定保留的时间不同,从而按一定次序由固定相中流出。

快速液相色谱柱的结构及其主要功能
由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝(封头)与柱填料等组成。
 
柱管:多用不锈钢制成,若果使用时柱压不高于70kg/cm2时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有很高的光洁度。用于柱填料的装填。
 
压帽:即色谱柱两端套合于柱管端外壁的塑性圆柱帽,中部有小孔,多为聚四氟乙烯制成,用于固定筛板。
 
密封环:位于接头螺旋环内壁的弹性环,多为聚四氟乙烯制成,用于色谱柱两端压帽与柱外壁的密封。
 
如何更好的使用快速液相色谱柱
1.拿到色谱柱后先阅读说明书,了解色谱柱的具体性能:耐受温度、耐受PH等。以及色谱柱的冲洗和保存条件。经过柱校测试确认色谱柱本身没有问题后方可正常使用。
 
2.样品充分前处理,确保样品的洁净;使用保护柱或在线过滤器,根据实际情况更换保护柱芯或滤片。
 
3.避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
 
4.应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中如果流动相中使用了缓冲盐,避免出现盐析。
 
5.选择使用适宜的流动相(尤其是PH),以避免固定相被破坏,PH过低共价键断裂,键和相水解;PH过高硅胶溶解。
 
6.使用过程中,如果压力升高,或出现污染,选择适当的条件冲洗或反冲。

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