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核糖核酸酶A
核糖核酸酶A(Ribonuclease A,缩写RNase A),是一种含4个二硫键的单链多肽,分子量约为13.7kDa(氨基酸序列)。RNase A是一种核糖核酸内切酶(endoribonuclease)。
核糖核酸酶层析纯化思路
提取及粗纯方案
我们基本采用牛胰腺硫酸铵盐析粗提物(由McDonald根据Kunitz氏纯化方法修改,“Methods in Enzymology",Vol.ⅡP429,1955.)。
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结论:
通过对牛胰腺盐析粗提物处理,上样CM Tanrose 6FF进行RNase A的分离纯化,其纯度得到了很大的提升,去除了较多的杂蛋白,经后续一定的处理后,跑SDS-PAGE胶,凝胶成像仪分析显示单一条带,符合纯化要求。