C18液相色谱柱的流动相配制及污染再生技术

 

　　C18液相色谱柱的流动相配制：

　　a、流动相对样品具有一定的溶解能力，并且保证样品不会在色谱柱内析出或长时间留在色谱柱内；

　　b、流动相不与样品发生反应；

　　c、流动相粘度尽量小，使样品得到高效分离的同时降低柱压，延长色谱柱寿命；

　　d、流动相沸点不能太低，避免有气泡产生，影响实验进行；

　　e、流动相要保证现配现用，不能储存太久，避免流动相生成杂质微生物影响检测；

　　f、流动相使用前先脱气。

 

　　C18液相色谱柱污染再生技术：

　　色谱柱污染后，可以用合适的溶剂冲洗，使柱效再生。

　　常规的再生洗涤方法是：分别用甲醇、三氯甲烷、甲醇/水各60mL依次通过色谱柱，再用100%甲醇60mL平衡色谱柱后封存，柱效将恢复正常。必要时，根据柱污染性质(如有机污染、盐类污染等)，采用0.05mol/LH2SO4、0.5mol/LH3PO4或0.1mol/LEDTA钠盐冲洗，然后再用水冲洗，用100%甲醇平衡色谱柱后封存。对于严重污染的色谱柱，可采用水、甲醇、乙烷依次冲洗后，按顺序倒过来再冲洗1次，每次所用溶剂60mL，不接检测器，用甲醇平衡色谱柱封存。