饲料中氯霉素的测定（农业部2438号公告-8-2016）

一、适用范围

适用饲料中氯霉素的测定（本实验采用复合饲料为样品）

参考标准：《农业部2438号公告-8-2016 饲料中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考的测定 液相色谱-串联质谱法》

二、提取步骤

1）称取5g样品于50mL离心管中，加入20mL乙酸乙酯，涡旋混匀，超声10min，离心8000r/min（10min），取上清液于鸡心瓶中；再用20mL乙酸乙酯分两次重复提取，合并上清液，加入0.5mL氨水，混匀，于45℃水浴旋转蒸发至近干。

2）加入1.5mL甲醇，混匀，再加入3.5mL4%氯化钠溶液溶解，转移至15mL离心管中，加入5mL正己烷振荡，离心6000r/min（10min），去除正己烷层；再加入5mL正己烷重复操作，后加入0.5mL氨水，混匀，待净化。

三、SPE净化步骤

SPE柱：月旭Welchrom® BRP 规格：60mg/3mL；

活   化：3mL 甲醇、3mL 水，弃去；

上  样：待净化液 全部上样，控制流速，不宜过快，弃去；

淋  洗：2mL水，1mL甲醇-乙腈-水-氨水溶液，弃去，并抽干小柱；

洗   脱：3mL5%氨化甲醇洗脱，抽干。

45℃水浴氮气吹干，用40%甲醇水定容至1mL，过0.22μm有机滤头，待上机。

四、色谱条件

色谱柱：月旭Ultimate® XB-C18 ,4.6*250mm,5μm；

流动相：甲醇-水（40-60）；

流   速：1.0mL/min；

柱   温：30℃；

进样量：20μL；

检测波长：280nm。

五、色谱图或者加标回收率结果

六、相关产品信息