液相色谱检测食品和饲料中苯并(α)芘样品预处理技术的新突破! 苯并(α)芘是一种五环的多环芳烃类物质,且又是多环芳烃中致癌性较强、污染较广的一种高活性间接致癌物,已同黄曲霉毒素B1、甲醛等物质被世界卫生组织(WHO)列为致癌性较强的1类致癌物。其广泛存在于水体、大气等环境,而从食品中直接摄取的苯并(α)芘则给人类健康带来最直接的威胁。
根据2023年6月30日实施的新版《食品安全国家标准食品中污染物限量》(GB2762-2022)规定,共有5大类食品是有强制性苯并(α)芘限量要求的,它们是:食用油脂及其制品,10μg/kg;谷物及其制品(如小麦、面粉等),2μg/kg;熏烧烤肉类和熏烤水产品,5μg/kg;此外还新增了一类食品——奶油类乳制品(稀奶油、奶油和无水奶油)中苯并(α)芘的最大限量规定:10μg/kg,这也是我国初次对这三大类的奶油类乳制品制定了强制性的苯并(α)芘限量规定。
目前我国各类食品中苯并(α)芘的检测主要是依据现行的《食品安全国家标准食品中苯并(α)芘的测定》(GB5009.27-2016)进行的。以高效液相色谱法为检测技术,中性氧化铝柱层析技术或分子印迹技术为样品预处理技术。由于涉及苯并(α)芘检测的食品种类大多为成分复杂的加工食品,所以如何从这些基质极其复杂的加工食品中分离提取和净化苯并(α)芘,就成为了其检测成功与否的关键。
中性氧化铝柱层析技术因其操作繁琐,有机溶剂消耗量大,检测结果稳定性差而较少被使用。使用较广泛的预处理技术是分子印迹技术,其虽然选择性好,但也存在着回收率受过柱流速影响较大;批次间产品的稳定性较差;净化效果较差,尤其是对于基质复杂、食油较高的样品,预处理后油脂和杂质的残留量较多,易对色谱柱和色谱仪器造成污染。另外,最重要的是《食品安全国家标准食品中苯并(α)芘的测定》(GB5009.27-2016)的应用范围中并不包含奶油类乳制品,也没有对应奶油类乳制品的专用样品预处理技术,并且该国标中现有的两种样品预处理技术均不适用于各种奶油类乳制品。
为了解决上述难题,月旭科技针对液相色谱检测食用油脂及其制品、谷物及其制品、谷物饲料、熏烧烤肉类、熏烤水产品和奶油类乳制品(稀奶油、奶油和无水奶油)中苯并(α)芘的样品预处理,专门研发了系列新产品——液相色谱检测食品和饲料中苯并(α)芘样品预处理专用方法包。主要采用固相萃取(SPE)技术,通过对并(α)芘有较高吸附作用的专用SPE吸附剂,用于液相色谱技术检测之前,对多种食品和饲料中的苯并(α)芘进行分离提取和净化的样品预处理操作。本系列新产品主要有以下技术优势:
1)操作简便快速,预处理效率高:可同时对多个样品进行预处理操作,且可人为加快过柱流速,过柱操作步骤耗时12-20min;
2)批次间差异小:一般各批次间回收率差异小于15%;
3)回收率高、且稳定性好:一般回收率在80%-100%之间,且重复性RSD<5%;
4)净化效果好:即使对于复杂基质的样品(如芝麻香油、辣椒油、稀奶油等),油脂和杂质残量留少,明显减少对色谱柱及色谱仪器的污染;
5)抗干扰能力强:即使对于基质组成较复杂的样品(如芝麻香油、辣椒油、稀奶油等),一般回收率及其稳定性也基本不受影响;
6)适用范围广:可用于食用油脂及其制品、谷物及其制品、谷物饲料、熏烧烤肉类、熏烤水产品等的样品预处理,尤其是可用于常温下呈固态油脂(如人造奶油、氢化油等)的样品预处理;
7)可用于各类奶油类乳制品(稀奶油、奶油、无水奶油)中苯并(α)芘液相色谱检测的样品预处理;
8)提供专用SEP柱和配套全部配制试剂,即用即开,即开即用。
9)有标准版、分装版和合装版3种不同的包装形式,以满足不同频次的检测需求。
相比于传统的分子印迹技术,本方法包的主要优势如下:
优势 | 预处理专用方法包 | 分子印迹柱 |
1)速度更快 | 可负压加快过柱流速,也不会影响回收率及其稳定性,整个过柱操作一般费时12-20min | 一般只能重力过柱,若人为加快过柱流速,回收率及其稳定性会受不利的影响,整个过柱操作一般费时30-40min |
2)净化效果更好 | 净化效果好,对于基质较复杂的食品样品(如芝麻香油、辣椒油、玉米面等),油脂、色素等杂质的残留量明显减少 | 净化效果差,对于基质较复杂的食品样品(如芝麻香油、辣椒油、玉米面等),油脂、色素等杂质的残留量更多 |
3)抗干扰能力更强 | 既使是基质较复杂的食品样品(如芝麻香油、辣椒油、玉米面等),一般回收率及其稳定性也基本不受影响 | 易受基质较复杂的食品样品(如芝麻香油、辣椒油、玉米面等)干扰,回收率及其稳定性会明显降低 |
4)批次间稳定性更好 | 不同生产批次的产品之间性质差异小 | 不同生产批次的产品之间性质差异比较大 |
5)适用范围更广 | 液态和固态的油脂都适用;还适用于谷物饲料、奶油类乳制品(稀奶油、奶油、无水奶油) | 不适用于固态的油脂;也不适用于谷物饲料、奶油类乳制品 |
6)更便捷 | 提供专用净化柱和配套全部专用试剂,即用即开,即开即用; 有标准版、分装版和合装版3种不同的产品包装形式,可分别适应不同的检测频次的需求; | 仅是专用净化柱,相关试剂要另外自行准备 |
7)其它 | 油脂样品的称样质量和最终提取液的定容体积与现行国标中的相关要求一致;主要操作方式与现行国标中分子印迹柱的相似;可直接套用现行国标中计算公式来计算结果 | / |
目前已上市的液相色谱检测食品和饲料中苯并(α)芘样品预处理专用方法包系列中主要的产品型号及其各自的检测应用范围如下表所示:
预处理专用方法包型号 | 主要的检测应用范围 |
Bap-01型 | 食用动植物油脂及其制品(包括固态油脂及其制品) |
Bap-02型 | 植物源性食品和谷物饲料 |
Bap-03型 | 奶油类乳制品(包稀奶油、奶油、无水奶油等) |
Bap-04型 | 食用动植物油脂及其制品(包括液态和固态油脂)、谷物及其制品、谷物饲料、熏烧烤肉类、熏烤水产品、奶油类乳制品(稀奶油、奶油和无水奶油) |