2015版《中国药典》规定“抗病毒口服液”要做指纹谱图,要求:
1、与标准图谱的相似度:除6号峰外,计算特征峰1〜7 号与S峰的相对保留时间,其中1号峰的相对保留时间在规定值的±5%之内,其余特征峰的相对保留时间在规定值的±8%之内。规定值为:0.58(峰 1)、1.0(峰 2 )、2.38 (峰 3 )、2.61(峰 4)、2. 65(峰 5)、4. 94(峰7)。
2、4号峰与5号峰的分离度不得低于1.0。
对此,各药企实验室普遍反映做出来的谱图效果较差,不符合药典要求。月旭科技特此验证本实验,发现采用Ultimate® LP-C18色谱柱*遵从药典方法条件下,可以符合药典要求。
流动相配置
流动相A:色谱级乙腈;
流动相B:取0.1mL的磷酸置1000mL超纯水中,超声脱气,即得。
样品溶液配置
对照品溶液:取(R,S)-告依春、连翘苷对照品适量,精密称定,加70%甲醇制成浓度分别为0.02mg/mL、0.06mg/mL的混合溶液,即得;
供试品溶液:精密称取抗病毒口服液样品25mL,用乙酸乙酯振摇提取6次,每次25mL,合并乙酸乙酯液,蒸干,残渣加70%甲醇溶解,置10mL量瓶中,加70%甲醇至刻度,摇匀,即得。
色谱条件
色谱柱:月旭 Ultimate® LP-C18(4.6×250mm,5μm)
流动相洗脱程序:
柱温:30℃
检测波长:236nm
流速:1.0mL/min
进样体积:10μL
实验图谱
1)对照溶液
2)样品
3)供试品放大图
结论:
相对保留时间均在药典规定范围内;
峰4与峰5的分离度为1.34,可以达到药典要求的1.0要求。