液相色谱柱系统由储液器、泵、进样器、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入液相色谱柱内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。
液相色谱柱实验步骤
1.将配制好的流动相置于超声波清洗器上脱气约30min。
2.根据实验条件,按仪器操作步骤将仪器调节至进样状态,待仪器流路及电路系统达到平衡,色谱工作站之“采样系统”基线平直时,即可进样。
3.吸取5μl苯、萘、联苯的甲醇溶液进样,并用色谱工作站记录色谱数据,同时记录色谱数据文件名。
4.用色谱工作站之“数据处理”系统处理数据文件。
液相色谱柱的优缺点
超液相色谱法的原理与液相色谱法基本相同,所改变的地方有以下几点:
小颗粒、高性能微粒固定相的出现。这样的孔径更加利于物质分离超高压输液泵的使用。
由于使用的液相色谱柱粒径减小,使用时所产生的压力也自然成倍增大。故液相色谱的输液泵也相应改变成超高压的输液泵。
高速采样速度的灵敏检测器。
使用低扩散、低交叉污染自动进样器。配备了针内进样探头和压力辅助进样技术;
仪器整体系统优化设计。色谱工作站配备了多种软件平台,实现超液相分析方法与液相分析方法的自动转换。