凝胶制备液相色谱仪分析方法开发中流动相的调整原则：
1、由强到弱：一般先用90%的乙腈或甲醇－水或缓冲溶液进行试验，可很快得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂（乙腈或甲醇）的比例。
2、三倍规则：每减少10%的有机溶剂（乙腈或甲醇）的量，保留因子增加约3倍，此为三倍规则。调整时注意观察各个峰的分离情况。
3、粗调转微调：当分离达到一定程度时，应将有机溶剂（乙腈或甲醇）10%的改变量调整为5%，并据此规则逐渐降低调整率，直至各组分的分离情况不再改变。
凝胶制备液相色谱仪的进样方式
1．隔膜进样。用微量注射器将样品注进专门设计的与色谱柱相连的进样头内，可把样品直接送到柱头填充床的中心，死体积几乎即是零，可以获得的柱效，且价格便宜，操纵方便。但不能在高压下使用；此外隔膜轻易吸附样品产生记忆效应，使进样重复性只能达到1~2%；加之能耐各种溶剂的橡皮不易找到，常规分析使用受到限制。
2．停流进样。可避免在高压下进样。但在HPLC中由于隔膜的污染，停泵或重新启动时往往会出现“鬼峰”；另一缺点是保存时间不准。在以峰的始末信号控制馏分收集的制备色谱中，效果较好。
3．阀进样。一般HPLC分析常用六通进样阀，其关键部件由圆形密封垫和固定底座组成。由于阀接头和连接管死体积的存在，柱效率低于隔膜进样，但耐高压，进样量正确，重复性好，操纵方便。
4．自动进样。用于大量样品的常规分析。
早期使用隔膜和停流进样器，装在凝胶制备液相色谱仪进口处。现在大都使用六通进样阀或自动进样器。进样装置要求：密封性好，死体积小，重复性好，保证中心进样，进样时对色谱系统的压力、流量影响小。
