1、适用范围
适用于辣椒酱中罗丹明B的检测。
2、检测原理
采用非极性有机溶剂（正己烷+丙酮）将罗丹明B从辣椒酱中溶解并提取，提取液过中性氧化铝SPE小柱吸附罗丹明B，然后用非极性有机溶剂（正己烷+丙酮）洗脱样品油脂和内源性干扰物，再用极性有机溶剂（甲醇-水）将罗丹明B从小柱上洗脱，供仪器分析
3、提取步骤
取辣椒酱1g，置入15ml离心管中，加入10ml 20%丙酮-正己烷溶液，超声提取 10 min，离心后取上清液。重复提取两次，合并三次提取的上清液，待SPE净化。
4、SPE柱净化过程
SPE柱：月旭Welchrom®罗丹明B专用固相萃取柱，3g/6mL
1）活化：10ml 20% 丙酮-正己烷溶液；
2）上样：将提取好的样品溶液加入小柱中，流速不宜过快；
3）淋洗：30ml 20%丙酮-正己烷淋洗至过柱流出液体为无色，弃去流出液，抽干小柱，
4）洗脱：10ml 80%甲醇-水溶液，收集洗脱液，用80%甲醇-水溶液定容至10mL，上机测定。
注意：
1）进行加标回收率实验时，往1g辣椒酱中加入40mg/mL 的标液0.125mL；
2）配置25ml 40mg/ml罗丹明B标准溶液，用20%丙酮正己烷无法溶解，需加入2ml甲醇助溶解。
3）将上清液加入月旭Welchrom®罗丹明B专用固相萃取柱中，含罗丹明B的样品提取液在柱上部会出现鲜亮的粉红色的荧光条带，且粉红条带随含量的增加而加深和加宽，不含罗丹明B的样品提取液不会出现粉红色条带，只会出现黄红色的不清晰的宽带；
4）用含20%丙酮-正己烷淋洗小柱，粉红色的条带不下移，但更清晰，其余的黄红色带下移可大部分被洗脱出，可判断为含罗丹明B的可疑样品；
5）待洗柱的流出液无色时，使用10ml 80%甲醇-水溶液洗脱，将罗丹明B色带洗下并收集。
6）罗丹明B标准溶液进液相时用80%甲醇-水溶液稀释上机；
7）过柱速率不能太快，否则回收率不理想；
5、色谱条件
色谱柱：月旭Ultimate XB-C18, 4.6×150 mm, 5µm；
流动相：75%甲醇-水溶液；
流速： 1.0mL/min
柱温： 30℃
检测波长：550nm
进样量： 20µL
6、色谱图或者加标回收率结果
